AbClon

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항체공학서비스

Antibody Sequencing

항체 유전자 서열 정보의 확인은 단클론 항체(mAb)의 humanization, affinity maturation등의 antibody
engineering, function optimization, 데이터베이스 뱅킹 및 특허 출원을 위한 필수적인 과정입니다.
Hybridoma 개발 후 세포주 관리가 어려우신 경우에도 강력하게 추천드릴 수 있는 서비스입니다.
Hybridoma는 비특이적 항체를 암호화하는 가성유전자(pseudogenes) 및 mRNA를 포함할 수 있고, 이는
표적항체를 클로닝하기 위한 primer에 의해 증폭될 수 있으므로 앱클론에서는 항체에 대해 독립적인 3~5 개의
클론을 sequencing하고 Fab 형채로 생산하여 ELISA로 항원과 반응시켜 정확성을 보장합니다.

특장점

  • Fab construction하여 항원과 반응하는 variable region 서열 확인
  • 소요기간: 약 6주
  • mAb 서열 분석의 풍부한 경험

고객준비사항

  • Hybridoma cell (>1×106 cells)
  • 항원 (50ug)

앱클론 제공

  • Variable region 서열
  • Variable region DNA (H-L chain)

서비스 Flow

Antibody humanization

Mouse Monoclonal Antibody의 친화도나 활성을 유지하면서 mouse 항체의 유전자를 90% 이상 humanization 해드립니다. 앱클론의 항체개발 노하우가 집약되어 있는 CDR grafting 플랫폼 기술은 정확하고 신뢰도가 높습니다.

특장점

  • 신뢰도 높은 CDR grafting 플랫폼
  • 소요기간: 약 3개월
  • 치료용 항체 개발 기술 보유

고객준비사항

  • Variable region 서열
  • 항원 (500ug)
  • Backbone (옵션)

앱클론 제공

  • Humanized 서열
  • Variable region Humanized DNA (H-L chain)
  • 친화도 결과
  • Full IgG(100ug)

서비스 Flow

  • 서열 분석
    • · Variable region 분석
    • · Frame work 비교
  • Frame work design
    • · CDR grafting 플랫폼
  • CDR grafting
    • · Human frame work
  • Humanized
    항체 생산
    • · codon optimization
    • · mammalian
      expression
  • Binding affinity 측정
    • · octet

Affinity maturation

생체 내에서는 자연적으로 발생하는 affinity maturation은 somatic hypermutation과 clonal selection에 의해 일어나는데 이를 in-vitro 상에서 항체 라이브러리 스크리닝 기술을 이용하여 mutation과 selection을 통해 maturation시켜 Affinity를 증가 시켜드립니다.
항원에 대한 항체의 친화도 (binding affinity) 증진을 목적으로 항체 variable region의 다양성을 가진 파지 디스플레이 라이브러리를 구축하여 고객사의 연구목적에 부합하는 친화도가 개선된 항체를 개발합니다.
Original 항체의 친화도를 측정한 뒤, 항체의 중요 아미노산을 제외한 나머지 CDRs region의 아미노산들에 대한 randomization이 진행되며, Fab형태의 항체 라이브러리를 개발하며 bio-panning 과정을 통해 친화도가 개선된 항체를 선별합니다.
Affinity maturation을 위해 개발되는 항체 라이브러리의 다양성은 약 109이며 Octet을 이용한 affinity 분석으로 친화도 증진을 확인합니다.

고객준비사항

  • Variable region 서열
  • 항원 (1mg)
  • DNA template

앱클론 제공 (TOP 5 clones)

  • Affinity matured 서열
  • Affinity matured variable region DNA (H-L chain)
  • Binding activity and affinity 정보
  • Fab(100ug)

서비스 Flow

라이브러리 구축
  • CDR 분석
    • · Affinity effective 확인
  • 라이브러리 디자인
    • · Non-effective
      randomization
  • Fab 구축
    • · 항체 라이브러리
  • 라이브러리 확인
    • · 서열 분석
Affinity 선별
  • Target binder 및 서열 확인
    • · Panning
    • · ELSIA
    • · Sequencing
  • Affinity 측정
    • · Octet
    • · K-Off ranking TOP 5
  • Fab 생산
    • · 100ug
    • · TOP 5
  • KD 측정
    • · Octet

문의사항

02-2109-1269