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항원서비스

단백질 발현 정제 서비스

앱클론은 고객님의 연구에 중요한 재조합 단백질 및 항체를 편리하게 사용 할 수 있도록 생산해 드립니다.
다양한 vector를 이용한 유전자 합성, 클로닝 서비스와 연계하여 단백질 발현 정제 서비스 진행이 가능합
니다. Small scale에서 최적의 발현 및 정제 조건을 확인하고 대량 배양 및 정제 과정을 거쳐 효율적인 단
백질 생산을 진행합니다. 연구목적에 따라 bacteria와 mammamlian 시스템에서 진행이 가능합니다.

Mammalian expression: HEK293F, CHO(option)

Tag 정제: Fc or His Tag

Bacterial expression: BL21(DE3), BL21(DE3)pLysS, BL21(DE3) RIPL

Tag 정제: His or GST tag

시스템 별 Flow

Mammalian expression

  • 30ml x 2 Condition Transfection & culture
    • · 발현 양상 테스트
    • · 2~3주
  • 30m x 2 Culture sup.
    Purification
    • · 정제효율 테스트
    • · Fc or His Tag
    • · 1~2주
  • 1L transfection &
    culture & Puri.
    • · scale up(1~10L)
    • · Fc Tag or His Tag
    • · 5~7주
  • Quality control
    • · SDS-PAGE 확인
    • · 1주
  • Delivery or
    Next process
    • · 완료
    • · 보고서

Bacterial expression

  • Optimization for
    expression
    • · 발현 양상 및 정제
      테스트
    • · 1~2주
  • 2L culture
    • · Scale up(2~50L)
    • · 1~2주
  • Purification
    • · His or GST Tag
    • · 1~2주
  • Quality control
    • · SDS-PAGE 확인
    • · 1주
  • Delivery or
    Next process
    • · 완료
    • · 보고서

특장점

  • · Native 단백질과 유사한 형태의 단백질 및 항체 생산 : Mammalian expression
  • · 저렴한 비용으로 신속하게 단백질 생산 : Bacterial expression

고객 준비사항

클로닝된 vector
Vector 정보
클로닝 정보
Signal 펩타이드 & Kozak 서열 정보 (Mammalian expression)
Tag 정보
Isotype 정보 (항체 생산)

펩타이드 합성 서비스

고품질의 펩타이드를 다양한 순도(~98%), 양(mg ~ kg), 길이(~150mer)로 고객이 원하는 형태로
합성할 수 있으며 변형된 펩타이드 합성도 가능합니다. 또한 항원 제작을 목적으로
하는 경우 앱클론만의 다양한 항체제작 노하우를 바탕으로한 펩타이드 서열분석 및 예측 서비스를
무료로 제공해드립니다.

서비스 범위

  • 펩타이드 서열분석 및 예측
  • 단순 합성부터 복잡한 변형 합성
  • 선형부터 원형 합성
  • 대량 합성
  • 다양한 순도 (>70%, >75%, >80%, >85%, >90%, >95%, >98%)
  • 다양한 Modification (Biotinylation, Phosphorylation, Acetylation, Methylation, Dye labeling 등)
  • 펩타이드 라이브러리 제작

서비스 Flow

  • Synthesis
    • · Solid-Phase Peptide Synthesis
  • Purification & Quality Control
    • · MS
    • · HPLC
  • Quality Assurance
    • · MS
    • · HPLC
  • Delivery or Next process
    • · 완료

List of Modification

List of Modification
N,C-Terminal
Modification
Special Amino acid Fluorescence/
Dye labeling
Cyclic
Peptide
Quenched
Fluorescent Peptide
Multiple Antigenic
Peptide System
Protein
Conjugation
Acetylation
(N-Terminal)
D-Arg, D-Cys, DAsp, D-Asn, D-Glu, D-Gln, D-Ser, D-His, D-Thr, D-Trp, D-Ala, D-Leu, D-Ile, D-Met, D-Pro, D-Val, DPhe, pGlu Biotin (NTerminal,
Y/N
Ahx)
Disulfide
bridge 1st
Abz/Tyr (3-NO 2) Asymmetric
4 branches
KLH
HYNIC
(N-Terminal)
Hyp, D-Lys,D-Tyr, D-Orn, Orn, Abu, Aib, (D)1-Nal, (D)2- Pal, (D)-4-Cl-Phe, Nva, Nle, Hse, Hcy, Pen, Mpa Biotin (Lys in
sequence)
Disulfide
bridge 2nd
EDANS/DABCYL Asymmetric
8 branches
BSA
DTPA
(N-Terminal)
N-Methyl amino acid (Ala, Phe, Leu, Ile, Val, Gly, Met) Biotin (without
Lys in
sequence)
Disulfide
bridge 3rd
Formylation
(N-Terminal)
Other amino acid Dinitrobenzoylation (Lys) FITC/5-FAM
(N-Terminal,
Y/N Ahx)
Amide cyclic
(Side chain,
Terminal)
Fatty acid
(N-Terminal)
Lys(Me 2) Dansyl
(NTerminal, Y/NAhx)
Myristic acid
(N-Terminal)
Phosphorylation
(Tyr, Ser, Thr, single site)
MCA (NTerminal)
Palmytolyl
(N-Terminal)
Tyr(SO3H2) p-Nitroanilide
(Pna, CTerminal)
Benzyloxycarbonylati
on (CBZ)
Ser(octanoic acid) AMC
(C-Terminal)
Amidation
(C-Terminal)
Succinylation
(Suc, N-Terminal)

Conjugation 서비스

Small molecule, peptide, chemical 등을 항원으로 사용할 경우 면역원성을 증가시키기 위해 carrier 단백질에 conjugation 하여 항체 제작 효율을 높여줍니다.

Carrier 단백질 종류 : KLH, BSA

Conjugation Linker

  • Sulfo-SMCC: -SH기 (thiol group) 를 활용하여 conjugation
    • - 펩타이드의 경우 cysteine을 이용하며 인위적으로 추가도 가능
      • · CysXXXXXXXXXX 또는 XXXXXXXXXXCys (O)
      • · XXXXXCysXXXXX (X)
    • - Carrier 단백질에 있는 lysine의 NH2기와 결합

Sulfo-SMCC conjugation
  • Glutaraldehyde: -NH2(free amino group, N-terminal)기를 활용하여 conjugation
    • - 펩타이드의 경우 lysine이 없어야 함
      • · XXXXXLysXXXXX (X)
    • - Carrier 단백질에 있는 Lysine의 NH2기와 결합

Glutaraldehyde conjugation
  • EDC: -COOH기 (carboxyl group, C-terminal) 를 활용하여 conjugation
    • - 펩타이드의 경우 aspartic acid와 glutamic acid가 없어야 함
      • · XXXXXAspXXXXX 또는 XXXXXGluXXXXX (X)
    • - Carrier 단백질에 있는 Lysine의 NH2기와 결합

EDC conjugation

Small molecule (펩타이드 포함) 을 carrier 단백질과 conjugation하여 항체를 제작할 경우 특이적인 항체 생성을 확인하기 위하여 면역에 사용한 carrier 단백질과 다른 종류의 carrier 단백질을 conjugation 하여 ELISA 스크리닝에 사용합니다.

  • 예) 면역 → KLH conjugated 펩타이드
  • 예) ELISA 스크리닝 → BSA conjugated 펩타이드

문의사항

02-2109-1269