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항원서비스

단백질 발현 정제 서비스

앱클론은 고객님의 연구를 보다 편리하게 할 수 있도록 다양한 재조합 단백질 및 항체를 생산해 드립니다.
다양한 vector를 이용한 유전자합성, 클로닝, sub클로닝 서비스와 연계하여 단백질 발현 정제
서비스진행이 가능합니다. small scale에서 최적의 발현 정제 조건을 확인하고 대량배양 및 정제과정을
거쳐 효율적인 단백질 생산을 진행합니다.
앱클론의 맞춤 재조합 단백질 및 재조합 항체 발현 서비스는 실험 목적에 따라 박테리아와 포유류
시스템에서 진행이 가능합니다.

Mammalian expression: HEK293F, CHO(optional)

Mammalian expression: HEK293F, CHO(optional)
- Tag 정제: Fc or His Tag
Bacterial expression: BL21(DE3), BL21(DE3)pLysS, BL21(DE3) RIPL
- Tag 정제: His or GST tag

시스템 별 Flow

Mammalian expression

  • 50ml transfection &
    culture
    • · 발현 양상 테스트
    • · 2~3주
  • 50ml purification of
    culture sup.
    • · 정제효율 테스트
    • · Fc or His Tag
    • · 1~2주
  • 1L transfection &
    culture & Puri.
    • · scale up(1~10L)
    • · Fc Tag or His Tag
    • · 5~7주
  • Quality control
    • · SDS-PAGE 확인
    • · 1주
  • Delivery or
    Next process
    • · 완료
    • · 보고서

Bacterial expression

  • Optimization for
    expression
    • · 발현 양상 및 정제
      테스트
    • · 1~2주
  • 2L culture
    • · Scale up(2~50L)
    • · 1~2주
  • Purification
    • · His or GST Tag
    • · 1~2주
  • Quality control
    • · SDS-PAGE 확인
    • · 1주
  • Delivery or
    Next process
    • · 완료
    • · 보고서

특장점

  • · Mammalian expression: native form과 유사한 modification된 형태의 단백질 및 항체 생산.
  • · Bacterial expression: 저렴한 비용으로 신속하게 단백질 생산, scFv, Fab 등의 항체생산.

펩타이드 합성 서비스

고품질의 펩타이드를 다양한 순도(~98%), 양(mg ~ kg), 길이(~150mer)로 고객이 원하는 형태로
합성할 수 있으며 변형된 펩타이드 합성도 가능합니다. 또한 항원 제작을 목적으로
하는 경우 앱클론만의 다양한 항체제작 노하우를 바탕으로한 펩타이드 서열분석 및 예측 서비스를
무료로 제공해드립니다.

서비스 범위

  • 펩타이드 서열분석 및 예측
  • 단순 합성부터 복잡한 변형 합성
  • 선형부터 원형 합성
  • 대량 합성
  • 다양한 순도 (>70%, >75%, >80%, >85%, >90%, >95%, >98%)
  • 다양한 Modification (Biotinylation, Phosphorylation, Acetylation, Methylation, Dye labeling 등)
  • 펩타이드 라이브러리 제작

서비스 Flow

  • Synthesis
    • · Solid-Phase Peptide Synthesis
  • Purification & Quality Control
    • · MS
    • · HPLC
  • Quality Assurance
    • · MS
    • · HPLC
  • Delivery or Next process
    • · 완료

List of Modification

List of Modification
N,C-Terminal
Modification
Special Amino acid Fluorescence/
Dye labeling
Cyclic
Peptide
Quenched
Fluorescent Peptide
Multiple Antigenic
Peptide System
Protein
Conjugation
Acetylation
(N-Terminal)
D-Arg, D-Cys, DAsp, D-Asn, D-Glu, D-Gln, D-Ser, D-His, D-Thr, D-Trp, D-Ala, D-Leu, D-Ile, D-Met, D-Pro, D-Val, DPhe, pGlu Biotin (NTerminal,
Y/N
Ahx)
Disulfide
bridge 1st
Abz/Tyr (3-NO 2) Asymmetric
4 branches
KLH
HYNIC
(N-Terminal)
Hyp, D-Lys,D-Tyr, D-Orn, Orn, Abu, Aib, (D)1-Nal, (D)2- Pal, (D)-4-Cl-Phe, Nva, Nle, Hse, Hcy, Pen, Mpa Biotin (Lys in
sequence)
Disulfide
bridge 2nd
EDANS/DABCYL Asymmetric
8 branches
BSA
DTPA
(N-Terminal)
N-Methyl amino acid (Ala, Phe, Leu, Ile, Val, Gly, Met) Biotin (without
Lys in
sequence)
Disulfide
bridge 3rd
Formylation
(N-Terminal)
Other amino acid Dinitrobenzoylation (Lys) FITC/5-FAM
(N-Terminal,
Y/N Ahx)
Amide cyclic
(Side chain,
Terminal)
Fatty acid
(N-Terminal)
Lys(Me 2) Dansyl
(NTerminal, Y/NAhx)
Myristic acid
(N-Terminal)
Phosphorylation
(Tyr, Ser, Thr, single site)
MCA (NTerminal)
Palmytolyl
(N-Terminal)
Tyr(SO3H2) p-Nitroanilide
(Pna, CTerminal)
Benzyloxycarbonylati
on (CBZ)
Ser(octanoic acid) AMC
(C-Terminal)
Amidation
(C-Terminal)
Succinylation
(Suc, N-Terminal)

Conjugation 서비스

Small molecule(펩타이드, chemical 등 20kDa 이하)로 항체를 하고자 하는 경우 항원의 크기가 작아서 면역반응이 일어나지 않을 수 있기 때문에 큰 사이즈의 carrier 단백질과 conjugation 하여 항체 제작에 사용합니다.

Carrier 단백질 종류 : KLH, BSA

Conjugation Linker

  • Sulfo-SMCC : -SH기를 활용하여 conjugation
    • - 펩타이드의 경우 Cysteine이 필요(서열 중간에 Cysteine이 없어야 함.)
      • · Cysteine이 펩타이드 서열 중간에 있을 경우 conjugation 에 영향을 미침
    • - Carrier 단백질에 있는 Lysine의 NH 2기와 결합

Sulfo-SMCC conjugation
  • Glutaraldehyde: -NH2(free amino group)기를 활용하여 conjugation
    • - 펩타이드의 경우 서열 중간에 Lysine이 없어야 함
      • · Lysine이 중간에 있을 경우 conjugation 에 영향을 미침
    • - Carrier 단백질에 있는 Lysine의 NH2기와 결합

Glutaraldehyde conjugation
  • EDC : -COOH(Carboxyl group)기를 활용하여 conjugation
    • - 펩타이드의 경우 서열 중간에 aspartic acid와 glutamic acid이 없어야 함
      • · aspartic acid와 glutamic acid이 중간에 있을 경우 conjugation 에 영향을 미침
    • - Carrier 단백질에 있는 Lysine의 NH2기와 결합

EDC conjugation

Small molecule(펩타이드 포함)을 carrier 단백질과 conjugation하여 항체를 제작 할 경우 small molecule만에 대한 항체 반응을
스크리닝하기 위하여 면역에 사용한 carrier protein과 다른 종류의 carrier 단백질을 conjugation 하여 ELISA 스크리닝에 사용합니다.

  • 예) 면역 → KLH conjugated 펩타이드, ELISA 스크리닝 → BSA conjugated 펩타이드

문의사항

02-2109-1269